Utiliser des seringues de mycélium liquide
Les seringues sont les récipients les plus pratiques pour transporter et conserver le mycélium de champignon ainsi que pour inoculer des substrats nutritifs. Outre le mycélium liquide lui-même, les seringues contiennent du sucre (généralement de l'extrait de malt), de la peptone de soja et de l'extrait de levure. Nos seringues sont produites dans notre laboratoire et testées en pureté sur boîtes de Pétri et sur grains.
Pour prolonger la vie et la qualité de la plupart de nos espèces, les seringues doivent être conservées au réfrigérateur à 4°C. Certaines espèces tropicales doivent être conservées entre 10 et 30°C. En général, leur qualité est meilleure jusqu'à 2 ans après la date indiquée sur la seringue et sur la poche (code espèce aa/mm/jj). L'exception à cette règle est le mycélium liquide Morel, qui se conserve seulement 6 mois après la date de production.
Le mycélium liquide est utilisé pour inoculer un milieu gélose à l'extrait de malt ou des grains stérilisés. Nos souches cultivées ont prouvé leur vitalité en laboratoire et leurs rendements en culture de champignons. Mais d’une souche sauvage à l’autre, la diversité est plus grande et les rendements plus variables.
Mode d'emploi sur boîtes de Pétri
- Dissoudre 50 g de poudre d’agar à l’extrait de malt dans 1 L d’eau. Stériliser pendant au moins 20 minutes à 15 psi ou 121°C.
- Devant une hotte ou dans une boîte à gants : verser la gélose liquide et les extraits dans les boîtes de Pétri en laissant les boîtes légèrement ouvertes afin de laisser s'échapper la vapeur. Une fois refroidis et solidifiés, fermez les boîtes de Pétri et conservez-les dans un sac ziplock au réfrigérateur.
- Pour inoculer, ouvrir les boîtes de Pétri dans un environnement stérile et déposer une goutte de mycélium liquide sur le milieu de culture. Scellez les boîtes de Pétri avec du Parafilm. Placer les boîtes inoculées dans un incubateur à 20-25°C. Attendez 4 à 10 jours pour que le mycélium se développe. A utiliser lorsque le mycélium a colonisé plus de la moitié du rayon de la coupelle. Le mycélium non contaminé peut être utilisé pour fabriquer un nouveau mycélium liquide ou pour inoculer des grains stérilisés.
Mode d'emploi sur les céréales
- Pour chaque petit sac de culture autoclavable (4A), utilisez 550 g de grains de seigle, 450 g d'eau et 3 g de gypse. Mélangez bien et repliez le haut du sac deux fois sur lui-même en recouvrant le filtre. Ruban fermé avec du ruban adhésif. Laissez reposer 12 heures. Si vous utilisez des sacs 14A, triplez les quantités. Ajustez les quantités proportionnellement si vous utilisez des contenants de volumes différents, tels que de petits bocaux Mason à large ouverture.
- Stériliser pendant 90 minutes à 15 psi ou 121°C.
- Refroidir à température ambiante devant la hotte, dans la boîte à gants ou dans un espace propre.
- Ouvrir le plus brièvement possible et injecter 1 ml de mycélium liquide par litre de grain stérilisé. Fermez et scellez les sachets avec une soudeuse à impulsion ou avec un élastique. Pour les bocaux Mason, il est possible de percer des trous dans le couvercle pour ajouter un filtre et un port d'injection. Dans ce cas, l'inoculation se fait par le port.
- Incuber dans un environnement propre et chaud (20-25°C). Une fois que le grain a été entièrement colonisé par le mycélium, il peut être utilisé pour inoculer d’autres grains stérilisés ou un substrat de fructification. Le grain colonisé peut être conservé plusieurs semaines au réfrigérateur avant d’être utilisé.
